回收液体石蜡_河南回收石蜡油价格

1.饼干中喷涂矿物油检测及抛光大米中矿物油检测？

2.冷冻油回收电话

3.填充母料蜡过多的后果

4.关于塑料回收再利用

5.环己烷的密度是多少？

亚硫酸氢钠测序法(bisulfite genomic sequencing)

直接测序法是建立在MSP基础上进一步深入研究CpG岛各个位点甲基化情况的方法.重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,行PCR扩增(引物设计时尽量避免有CpG,以免受甲基化因素的影响)所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶.最后,对PCR产物进行测序,并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化.此方法一种可靠性及精确度很高的方法,能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态.在寻找有意义的关键性CpG位点上,有其他方法无法比拟的优点.测序法以CpG岛两侧不含CpG点的一段序列为引物配对区,所以能够同时扩增出甲基化和非甲基化靶序列.它的不足是耗费时间和耗资过多,至少要测序10个以上的克隆才能获得可靠数据,需要大量的克隆及质粒提取测序,过程较为繁琐、昂贵.

第一部分 基因组DNA的提取.

这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以.DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应该是完整的.

此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要.因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者.

使用两者的细节：

1：蛋白酶K可以使用灭菌双蒸水配制成20mg/ml；

2：RNA酶必须要配制成不含DNA酶的RNA酶,即在购买市售RNA酶后进行再处理,配制成10mg/ml.否则可能的后果是不仅没有RNA,连DNA也被消化了.两者均于-20度保存.

验证提取DNA的纯度的方法有二：

1：紫外分光光度计计算OD比值；

2：1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳.

我倾向于第二种方法,这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度,并根据Marker的上样量估计其浓度,以用于下一步的修饰.

第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA

如不特别指出,所用双蒸水（DDW）均经高压蒸汽灭菌.

1：将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用DDW稀释至50ul；

2：加5.5ul新鲜配制的3M NaOH；

3： 42℃水浴30min；

水浴期间配制：

4：10mM对苯二酚（氢醌）,加30ul至上述水浴后混合液中；（溶液变成淡**）

5： 3.6M亚硫酸氢钠（Sigma,S9000）,配制方法：1.88g亚硫酸氢钠使用DDW稀释,并以3M NaOH滴定溶液至PH 5.0,最终体积为5ml.这么大浓度的亚硫酸氢钠很难溶,但加入NaOH后会慢慢溶解,需要有耐心.PH一定要准确为5.0.加520ul至上述水浴后溶液中.

6：EP管外裹以铝箔纸,避光,轻柔颠倒混匀溶液.

7：加200 ul 石蜡油,防止水分蒸发,限制氧化.

8：50℃避光水浴16h.

一般此步在4pm开始做,熟练的话不到5pm即可完成,水浴16h正好至次日8am以后收,时间上很合适.

这一步细节：

1：基因组DNA的量不需十分精确,宁多勿少,因为在以后纯化回收步骤中会有丢失,且此方法修饰最多可至4ug.

2：所有试剂均须新鲜配制,所以配液的技术要过关,既要快,又要精确.

3：亚硫酸氢钠溶液呈强酸性,一定用碱将PH调制5.0,否则PH不合适会影响后续纯化吸收.

4：水浴最好达16小时,虽可以短至8小时,但后者修饰会有不完全.

第三部分 修饰后DNA纯化回收

EP管如无特别说明均为高压蒸汽灭菌的.

1. 将移液器枪头伸入石蜡油层下,先轻轻加压使其中一小段石蜡油排出,然后吸取混合液至一洁净1.5mlEP管中.

2：以下使用Promega Wizard Cleanup DNA纯化回收系统（Promega,A7280）

1）70℃水浴预热DDW；配制80%异丙醇；

2）加1ml Promega’s Wizard DNA Clean-up resin,轻柔颠倒混匀,使DNA充分与树脂结合；

3）由于该试剂盒中仅配备针筒没有针栓,如果有真空负压吸引器,使用起来很方便；如果没有,需要自备3ml-5ml注射器.将注射器针筒与试剂盒提供的回收小柱紧密连接后,将上述混合物用移液器移至针筒内,用2ml以上的EP管放置小柱下接收废液.加针栓,轻轻加压,将液体挤出,此时可见小柱内有白色的树脂沉积.

4）将注射器与小柱分离后拔出针栓,再将针筒与小柱连接,向针筒内加入2ml 80％的异丙醇,插入针栓,轻轻加压,将异丙醇挤出.此为洗涤步骤.

5）将注射器与小柱分离,将小柱置于洁净1.5ml洁净EP管上,离心12000rpm,2min,以甩去残余异丙醇成分,使树脂干燥.此时,修饰后DNA处于与树脂结合状态.

6）将小柱取下置于另一洁净1.5mlEP管上,移液器加50ul预热好的DDW,室温放置5min.

7）离心12000rpm,20s,此为洗脱步骤,此时EP管内液体即为洗脱的修饰后DNA溶液,终体积为50ul.

3：加5.5ul 新鲜配制的3M NaOH,室温放置15min.

4：加33ul 10M乙酸铵,以中和NaOH,使溶液PH于7.0左右.

5：加4ul 10mg/ml糖原,此作为沉淀指示剂,因为其与乙醇混合后可产生沉淀,便于以后离心后辨别回收物的位置,以防在吸取残余乙醇时将回收物吸走.其实,加入这些糖原究竟能起多大作用,不好说.不过有国产糖原卖,包装不大,也很便宜,买来一用,算严格遵守文献的步骤吧.

6：加270ul 冰无水乙醇,置于-20度,过夜沉淀.有人为沉淀最短可至2小时,但我认为时间长些可能会更好.并且做到此步骤时,一般会到中午,如果样本多的话要到下午,不妨放置过夜,日程可以轻松些,顺便做些其他试验.如果想当天做完,没有问题,但我认为最好多沉淀些时候,至少6小时吧（这是经验,我做过最少6小时,也是可以的,再短就不敢发表意见了）

7：4度,12000rpm离心,30min,倒去上清液,收集沉淀.不必吸净.

8：加500ul 70%乙醇,不要将沉淀吹打起来,只要把乙醇加上即可.轻柔倾斜EP管,旋转一圈,再次离心,4度12000rpm,5min.离心后倒掉上清,再加同量乙醇,同样再做一遍.此为洗涤步骤,共2次.

9：倒掉上清,并常温简短离心后,将附壁乙醇离至EP管底,移液器小心将残余液体吸净,室温干燥5min,或沉淀由不透明变为半透明或透明时,加入20ul- 30ulDDW,溶解沉淀.至此,已完成了修饰后DNA的纯化回收,所得为修饰后DNA溶液,可用于此后的进一步实验.

10：-20℃保存DNA溶液.

此步细节：

1：在使用注射器时,一定要用力均匀且轻,如使用暴力,会将小柱内的薄膜挤破,失去作用.

2：乙酸铵、糖原不需新鲜配制,糖原配好后放在-20度保存,乙酸铵室温即可,因为这样浓度的乙酸铵非常难溶,一旦放在4度,取出用时也会有很多溶质析出.

3：异丙醇、70%乙醇都不需要新鲜配制,但如果用量大,现场配也很方便.

此步关键是在树脂与DNA的结合上,这就再次强调第二部分调亚硫酸钠PH值得重要性.因为树脂与DNA结合需要有一个适当的PH,如前一步没做好,此步树脂不能与DNA很好结合,将会带来灾难性后果,即DNA随着液体被挤出了,洗脱时实际已没有任何DNA了.

第四部分 修饰后DNA用于PCR

这一步也没有悬念.我主要谈一下这里面的几个比较棘手的问题：

1：引物问题：我感觉自己设计引物有相当的难度,我曾设计过几对引物,并且试验了一下,但以失败告终.如果时间充裕、作的又是比较新的基因文献不多,自己设计引物没有问题.如果不是这样,还是参考文献更好些.首先查阅SCI分值高的文献,然后是著名实验室的文献,如果国内有做的,更好了,可以直接联系咨询.查到序列后,一定要和Genbank中的序列进行比对,防止有印刷错误造成的个别碱基的差别.然后再到google上搜一下,看用的人多否,体系条件是否一样.用的人多、体系条件一样,表明可重复性比较强.我也是按此行事,算比较顺利.

2：Taq酶问题：有文献用高保真的金牌 Taq（Platinum）,但我感觉只要体系正确、变性退火等条件合适,一般的热启动酶是可以的.我开始使用的是Takara的LA Taq,很好用,配有10x含mg++的LA缓冲液.有时候用没了,暂时以Takara 的普通Taq酶也可以.如何选择,可以根据自己的情况.初作者还是用好一点的酶.

3：PCR的条件：变性一般都选择95度,3min.其余我感觉还是根据文献,退火可以根据你的引物的退火温度在小范围内尝试.一般和文献报道差别不大.只是扩增片断特异性的问题.建议根据文献.

4：做PCR的EP管最好选择进口的,壁薄且厚度均匀,这可以保证温度的迅速变化可以及时传递给管内的反应液,使体系真正在所设定的温度下运行.

5：PCR仪：如果在某一个仪器上作出来了,最好一直用此仪器继续.不同的仪器“脾气”也不一样,但EP管必要和仪器内的插孔紧密结合方好,留有空隙,我认为会影响温度的传递.

这一部分有些啰嗦,只是个人一些不成熟经验.有疑问处,请大家指出,交流.今天先到这里,现写一些内容,比较费劲,总是不能一挥而就.望见谅.歇息一会准备写最后蓝白斑筛选克隆这一部分.

第五部分 PCR产物的凝胶回收

这一步比较简单,可以购买一个凝胶PCR产物回收试剂盒,国产的就很好、价格也合理,比如TIANGEN的产品（用过）.把切下来的胶按说明书操作即可.

几个细节：

1：PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,要使用新配的电泳液.凝胶浓度1%-2%均可.

2：凝胶DNA回收时在300nm紫外灯下观察条带位置,切取目的片断所在位置的凝胶,尽量小,保证特异性.

3：紫外照射时间不能过长,否则对DNA有损伤.

4：回收后的DNA如不马上用就储存于-20度,在数月内是很稳定的.

第六部分 PCR产物与T载体的连接和转化、蓝白斑筛选

1：连接T载体（本实验使用的是Promega的试剂盒）

15ul体系

T-easy 1ul

Ligase 1ul

2xbuffer 7.5ul

DNA 5.5ul

4度,过夜.

2：连接产物的转化

1）-70度冰箱内取出感受态细菌,融化后置于冰上；

2）连接产物15ul 全部加入,至于冰上30分钟；

3）42度, 90秒钟；

4）冰上2分钟；

5）800ul LB培养基；

6）280rpm,37度,摇床45分钟（将管放水平了摇,保证菌液摇匀）；

7）8000rpm,1分钟；在超净台内去上清,留100-150ul；

8）涂板：37度孵箱过夜；（板为含有氨苄青霉素的固体LB培养基）

先涂：X-gar 35ul

IPTG 25ul

后涂：混悬液

过夜后可见板上长出很多蓝色或白色斑点,取白色斑点,尤其是蓝色斑点周围的白色斑点,此处自联率较低.

3：取白斑,划种于新板上

新板：先涂：X-gar 35ul

IPTG 25ul

然后于板底划出分区,进行标记.根据需要,一般一板作50个克隆没有问题.

针头挑白斑划2道于板上相应区域内.

37度,孵箱过夜.

4：联系测序公司送测序.一般一个克隆在35-45元.

这一部分的细节：

1：涂板要均匀,保证Xgar和IPTG均匀分布在板面上；

2：不要让蓝白斑长得太满,否则选取克隆时容易一下挑2个.

饼干中喷涂矿物油检测及抛光大米中矿物油检测？

邯郸市有回收红铁粉的厂家。邯郸市丛台区宝洋再生资源回收有限公司，注册资本50万元，地址位于河北省邯郸市丛台区中华大街378号华祥商夏1305-1，经营范围为再生资源回收及批发染料、颜料、色粉、香精、水性涂料、树脂、橡胶制品、钛白粉、油墨、锌粉、聚醚、塑料制品、塑料颗粒、食品添加剂、导热油、液压油、润滑油、溶剂油、石蜡、工业助剂（不含危险化学品）、化工产品（不含危险化学品）、日化用品的销售。

冷冻油回收电话

楼主你好： 喷涂矿物油主要原料液体石蜡，为石油提炼副产品，有润滑作用及不被人肠道吸收特点，如长期摄入可引起消化系统障碍和脂溶性维生素吸收障碍。

抛光大米中矿物油检测

1．试剂

①石油酴。

②浓HzS04液。

③2mol／LKOH乙醇液。

④29／6NaSO4液。

⑤无水NazSOa。

2.检测

称取50g大米样于锥形瓶中，加石油醚50mL，振荡30min，过滤，滤液于分液漏斗中，加浓H：S04 10 mL×3，分3次提取，弃磺化层。加2％Na2S04液50 mL于分液漏斗中，振摇，静置分层，弃水层，有机相经无水Na。S04脱水于锥形瓶中，（详细请参考国家标准物质网www.rmhot.com）水浴挥干，加2 mol·L叫KOH乙醇液25ml溶解，沸水浴上回流10min，加沸水25mL，混匀，观察，若呈浑浊或有油析出为矿物油(同时做正常大米对照)。

3．说明

①本法可进行定量。将锥形瓶中石油醚挥干后，用石油醚5mL溶解，移入恒重称量皿中，挥去石油醚，置烘箱100℃干燥至恒温.

②本法用石蜡油做回收试验，回收率91．2％～98．5％，可检出O．5 9／6矿物油。

饼干中喷涂矿物油检测

1．试剂

①无水。

②饱和KOH液。

③乙醇。

2．检测

称取30g饼干于锥形瓶中，加无水50ml，振荡20min，将层移人蒸发皿中，挥干称取1g残渣于锥形瓶中，加饱和KOH液1mL、乙醇25mL，混匀，连接冷凝回流装茫?亓?min后，加沸水25mL，观察，若呈浑浊或油状物析出为掺矿物油(同时做正常饼干对照)。

3．说明

喷涂矿物油主要原料液体石蜡，为石油提炼副产品，有润滑作用及不被人肠道吸收特点，如长期摄入可引起消化系统障碍和脂溶性维生素吸收障碍。

填充母料蜡过多的后果

电话是：400-900-2918。

加氟过多的话，一般空调会出现制冷不良或者根本不制冷的情况，但是一内些特殊容的空调会出现其他的情况，不然长虹空调有些型号加氟过多会导致压缩机电流过大出现过流保护。

在判断确定制冷系统管路内缺冷冻油的时候，应把管路内冷媒回收到室外机管路内，从低压截止阀针阀处加注适量新冷冻油，之后再抽真空并放开冷媒。如果系统管路内原有冷冻油碳化严重，还要彻底清洗空调系统管路内部。

对冷冻油的要求有以下几方面：

（1）凝固点 冷冻油在实验条件下冷却到停止流动的温度称为凝固点。制冷设备所用冷冻油的凝固点应越低越好（如R22的压缩机，冷冻油应在-55℃以下），否则会影响制冷剂的流动，增加流动阻力，从而导致传热效果差的后果。

（2）黏度 冷冻油黏度油料特性中的一个重要参数，使用不同制冷剂要相应选择不同的冷冻油。若冷冻油黏度过大，会使机械摩擦功率、摩擦热量和启动力矩增大。反之，若黏度过小，则会使运动件之间不能形成所需的油膜，从而无法达到应有的润滑和冷却效果。

（3）浊点 冷冻油的浊点是指温度降低到某一数值时，冷冻油中开始析出石蜡，使润滑油变得混浊时的温度。制冷设备所用冷冻油的浊点应低于制冷剂的蒸发温度，否则会引起节流阀堵塞或影响传热性能。

关于塑料回收再利用

后果是会造成损伤。

填充母料中大量引用PE蜡、石蜡、白油、回收料、硬脂酸等小分子化合物，应用于复合材料，对材料性能如:冲击韧性、弯曲强度、拉伸强度、环刚度、挺度等力学性能损伤特别大。

客户一听说填充母料的主要成份是碳酸钙，马上就会说：是石头粉啊，这个肯定不能用。大部分人对于填充母料理解上存在这个误区。在客户的理解中填充母料的价位停留在一两千档次，质量分分钟都会变化，或以前也曾经试用过，可能是应用不当而对产品的质量产生严重影响，导致对塑料填充母料特别排斥。

环己烷的密度是多少？

是不可以的。

(1) 回收石蜡与烯烃：许多塑料经高温分解可生成石蜡类或烯烃类碳氢化合物气体，其生成量因塑料种类不同差异很大。聚乙烯和聚苯乙烯等塑料的热分解中就大量生成这种气体，而且随反应温度的升高，气态生成物增多，液态生成物变少。

①分解油。低密度聚乙烯在 4200C 下热分解 2h ，其生成物中石蜡占 60 ％，烯烃占 40 ％。如把高密度聚乙烯用熔化器连续导入反应系统，在 400 ～ 4500C 热分解，可得到分解油 94.5 ％，分解气 5.5 ％。回收量依次为：丙烯 > 乙烯，丙烷 > 甲烷 > 正丁烷。

为了提高分解油的收率，可使用高压釜，在二氧化碳、一氧化碳、氦及氢的气氛中使聚乙烯热分解，反应温度在 340 ℃左右，油化率可达到 87 ％～ 93 ％；如再添加水来控制分解时的局部过热，也可提高油化率。使用漆原镍或 Pt-C 作催化剂，使聚乙烯加氢分解，则油化率可达到 85 ％～ 90 ％。

聚丙烯在 4000C 左右进行热分解、回收的分解油可达 95 ％。若以氯化锌为催化剂，在高压釜中对聚丙烯进行加氢分解，可以得辛烷值为 83 的分解油 ％。这种油质量上完全可以用作汽油；如添加水进行加氢分解，可得到辛烷值为 86 的分解油，但其中烯烃含量为 40 ％。分解气中甲烷最多，其次是乙烷和丙烷等。

① 分解气。热分解气化反应多用于回收烯烃类气体，可从聚乙烯中回收乙烯，从聚丙烯中主要回收丙烯。

② 采用熔化炉将聚乙烯连续导入反应系统，在 590 ～ 8000C 下进行热分解，气化率为 75 ％，在 7000C 左右时即可得到 32% 的乙烯，加上丙烯和丁烯 -l 等合计达 58 ％。若使用熔融盐热分解炉，分解温度提高到 850 ℃，则乙烯可得 30 ％，丙烯为 17 ％，烯烃合计可得 60 ％；在催化剂的作用下，比不用催化剂的热分解快 2 ～ 7 倍。在 4800C 时，催化剂活性对气化率大小的顺序依次是 ( 由大到小 ) ． SiO2 · AL2O3 、 CaX 、 NaX 、 NaY 、 CaA 、 NaA 。

聚丙烯在 500 ～ 6000C 下进行分解，气化率随反应温度上升而增大，在 6000C 时可得丙烯 26% ，其次是乙烯和甲烷。使用熔融盐热分解炉时，分解温度达 9000C 左右，从中可得 20 ％的乙烯， 20 ％的甲烷和只有 10 ％的丙烯。同样，可用固体酸性催化剂对聚丙烯进行催化分解，即以二氧化硅和氧化铝为催化剂，使用流化床型常压反应装置，在 4500C 时主要生成甲烷，其次为丙烯和乙烷等。液态石蜡的生成量比无催化剂时增多。

相对密度（水=1）0.78。

1、外观与性状：无色液体，有刺激性气味。

2、溶解性：不溶于水，溶于乙醇、、苯、丙酮等多数有机溶剂。

3、状态：为有汽油气味的无色流动性液体,不溶于水，可与乙醇、、丙酮、苯等多种有机溶剂混溶,在甲醇中的溶解度为100份甲醇可溶解57份环己烷(25℃)。

扩展资料：

化学性质：

易挥发和极易燃烧，蒸气与空气形成爆炸性混合物，爆炸极限1.3～8.3%(体积)。遇明火、高热极易燃烧爆炸。与氧化剂接触发生强烈反应，甚至引起燃烧。在火场中，受热的容器有爆炸危险。其蒸气比空气重，能在较低处扩散到相当远的地方，遇火源会着火回燃。

对酸、碱比较稳定，与中等浓度的硝酸或混酸在低温下不发生反应，与稀硝酸在100℃以上的封管中发生硝化反应，生成硝基环己烷。在铂或钯催化下，350℃以上发生脱氢反应生成苯。

与氧化铝、硫化钼、钴、镍、铝一起于高温下发生异构化，生成甲基戌烷。与三氯化铝在温和条件下则异构化为甲基环戊烷。

百度百科——环己烷